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    【期刊论文】 •

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    魏东 1

    发文量: 被引量:0

    张学成 2
    • 《中国海洋药物》 • 2003年第2期 11 - 16, 共6页
    机构: [1] 华南理工大学食品与生物工程学院[2] 中国海洋大学海洋生命学院

    摘要: 在群体水平上研究了海产野生型眼点拟微球藻(Nannochloropsis oculata)及其抗除草剂Sandoz9785的细胞培养物在生长和脂肪酸组成方面的特性。结果表明,野生型藻株对Sandoz 9785较为敏感,除草剂用量为50μmol·L^(-1)时其生长的被抑制率为75%。在除草剂抑制作用下,野生型细胞的总脂肪酸含量显著下降,而EPA含量显著提高。在160μmol·L^(-1)和320μmol·L^(-1)Sandoz 9785浓度下,筛选到抗除草剂的细胞培养物R160和R320,其平均比生长速率与野生型没有显著差异,细胞的总脂肪酸、16;0、16:1ω9、18:0和18:1ω9的含量都低于野生型藻株,但20:5ω3(EPA)含量则高于野生型。R160在无除草剂的培养基中EPA含量最高,可占细胞干重的3.51%,比野生型提高了30%,但与野生型差异不显著。并讨论了抗性培养物抗Sandoz 9785和积累 EPA的机理。 摘要译文
    关键词: 抗除草剂 ;海洋微藻 ;生长 ;积累 ;EPA ;特性
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    被引量 1
    2
    2. 认领
    【会议论文】 •

    发文量: 被引量:0

    魏东

    发文量: 被引量:0

    张学成
    作者单位: [1] 青岛海洋大学海洋生命学院[2] 青岛海洋大学海洋生命学院

    会议名称:
    会议时间: 2001-11-01
    摘要: Sandoz9785是一种哒嗪酮(pyridazinone)类除草剂,化学名为4-chloro-5(dimethyamino)-2-phenyl-3(2H)pyridazinone,国外已成功地将其应用于富含多不饱和脂肪酸(PUFAs)微藻品系的遗传选育,但在国内尚未见到相关研究报道。本文在群体水平上研究了海产野生型眼点拟微球藻(Nannochloropsis oculata)及其抗除草剂 Sandoz 9785的细胞培养物在生长和脂肪酸组成方面的特 摘要译文
    关键词: 除草剂 ;野生型 ;海洋微藻 ;总脂肪酸 ;EPA
    引用
    3
    3. 认领
    【学位/硕士】 •

    发文量: 被引量:0

    周雨晴
    • 中国海洋大学 • 导师:潘克厚 • 2018年

    摘要: 海洋微拟球藻(Nannochloropsisoceanica)属于大眼藻纲(Eustigmatophyceae),微拟球藻属(Nannochloropsis),一般直径为2~4μm,是一种单细胞真核微藻。由于其具有很高的光合作用速率,且生长速度快、二十碳五烯酸(Eicosapentaenoicacid,EPA)含量高,引起了学者们的广泛关注。  实验包括以下三个部分:  第一部分:使用除草剂Sandoz9785筛选高EPA微拟球藻,发现当除草剂浓度为58μmoL/L时,可抑制99.1%的藻细胞生长,在该除草剂浓度下,筛选获得2株抗除草剂藻株SA1和SA2。将抗性藻株在无除草剂f/2液体培养基中培养到指数期和平台期,分别测定其叶绿素荧光参数。研究显示,PSⅡ的最大光能转化效率(Fv/Fm)、PSⅡ的潜在活性(Fv/F0)、PSⅡ的实际光能转化效率(ΦPSⅡ)、PSⅡ光合电子传递效率(ETR)等均高于出发藻株。其中,SA2的比生长速率达到0.199d-1,较出发藻株提高了2.31%;SA1的EPA含量较出发藻株藻提高了5.44%,占总脂肪酸含量的27.35%。研究结果表明,使用除草剂Sandoz9785可有效筛选出EPA含量较高的微拟球藻藻株。  第二部分:对ARTP诱变十株微拟球藻进行筛选,初筛获得一株高EPA含量诱变藻株ARTP04(第十七天)EPA含量占总脂肪酸的24.75%,比出发藻株显著提高27.38%。复筛验证其结果与初筛一致,诱变藻株ARTP04(第十五天)EPA含量占总脂肪酸20.79%,比出发藻株的EPA含量显著提高了14.29%。这证明ARTP诱变微拟球藻筛选高EPA含量微拟球藻工作的有效性和可行性。  第三部分:利用转录组学方法初步解析EPA合成的代谢调控网络。转录组测序共得到48,369个基因中,发现ARTP04与出发藻株之间有显著差异表达表达基因3,170个,其中包括上调表达基因1425个和下调表达基因1745个。对这些差异表达基因富集分析显示,前8个GO富集条目,涉及甲基转移酶活性、蝶啶化合物的生物合成和代谢过程、双链RNA结合、突触和叶绿素的代谢过程,这意味着ARTP突变可能导致细胞信号转导、次生代谢、DNA和RNA修饰的改变。经KEGG富集分析(P-Valuelt;0.05),大多数差异基因被富集到次级代谢、氨基酸代谢(Valine,leucine,isoleucineandglutamate)、DNA修复、嘌呤代谢、不饱和脂肪酸生物合成、叶绿素代谢等代谢通路中。  综合生理生化和基因表达结果,认为ARTP诱变微拟球藻EPA积累的分子机制为:ARTP诱变手段使微拟球藻DNA严重损伤时,藻细胞需要大量氮素合成核酸、蛋白质等含氮生物大分子,但培养基中有限氮源使细胞无法摄入足够氮,于是细胞将胞内多余的支链氨基酸(Valine,leucineandisoleucine)降解以回收氮元素,磷酸戊糖途径提供5-磷酸核糖,以提供诱变藻细胞修复DNA和维持生长需要的最低氮。支链氨基酸脱氨产生的碳骨架通过分解代谢转化成乙酰CoA、琥珀酰CoA等,碳元素相对过量,为了维持其胞内的碳、氮平衡和氨基酸累积的动态平衡,氨基酸碳骨架进入TCA循环,中间产物增多,一部分将用来产生脂肪酸合成的底物乙酰CoA,另一部分经氧化脱羧产生ATP和还原力,两过程结合促进胞内大量的合成脂肪酸。  综上所述。本研究证明了除草剂Sandoz9785可有效筛选高EPA微拟球藻,从ARTP诱变十株微拟球藻筛选获得一株高EPA含量诱变藻株ARTP04,并利用转录组测序初步探究了藻类在ARTP诱变后EPA积累的关键基因、关键调控点及各物质代谢调控网络。 摘要译文
    关键词: 海洋微拟球藻 ;二十碳五烯酸 ;转录组学 ;代谢组学
    引用
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