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【期刊论文】 • 尹田鹏 ^1,2陈阳 ¹舒燕 ²蔡乐 ²

+1位作者 • 《云南大学学报（自然科学版）》 • 2018年第1期 148 - 153，共6页

机构： [1] 遵义医学院珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室[2] 云南大学云南省高校功能分子分析与生物转化重点实验室化学科学与工程学院

摘要：运用色谱分离材料和手段,结合现代波谱分析技术,从乌头属植物玉龙乌头中首次分离鉴定了12个非生物碱成分:4-hydroxy-4-(5-(hydroxymethyl)furan-2-yl)butan-2-one(1),(E)-4-[5-(hydroxymethyl)furan-2-yl]but-3-en-2-one(2),5-羟甲基糠醛(3),E-3-carboxy-2-petene-dioate 5-methyl ester(4),Z-3-carboxy-2-petenedioate 5-methyl ester(5),对羟基反式肉桂酸(6),对羟基顺式肉桂酸(7),藜芦酸甲酯(8),环氧松柏醇(9),酪醇(10),连翘脂素(11)和β-sitosteryl-3-O-β-D-glucopyranoside-2'-O-palmitate(12).其中化合物1是一个新天然产物,其数据经2D NMR进行了归属并首次报道.

摘要译文

关键词: 乌头属；玉龙乌头 ；化学成分 ；核磁共振波谱法

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2. 认领

【学位/硕士】 • 刘思思 • 南昌大学 • 导师：王健 • 2021年

摘要：天然产物一直以来都可以作为药物研究的重要来源,因此,对其化学成分的研究具有重要意义。附子作为乌头属中重要的中药材之一,广泛应用于各种疾病,但使用不当会导致严重中毒,毒性主要体现在心脏毒性、神经毒性、胚胎毒性和肾脏毒性。而使用同一属植物玉龙乌头解附子之毒已久,因此,本课题的目的是研究附子和玉龙乌头的化学成分,并建立玉龙乌头中对附子中毒具有生物活性的生物碱的研究策略,探究其解毒的物质基础。在本论文中,通过传统柱色谱和液相色谱分离技术对乌头属药材附子进行了分离纯化,通过核磁、质谱等表征手段,确认单体分别为Hypaconitine(1),Mesaconitine(2),Deoxyaconitine(3),Indaconitone(4),Songorine(5),Aconine(6),Beiwutine(7),8-O-Methyl-1-epineoline(8),Neoline(9),Senbusine A(10),Delcosine(11),Foresticine(12),14-Benzoylmesaconine(13),Magnoflorine(14),(-)-14α-benzoyloxy-N-ethyl-8β,13β,15α-trihydroxy-3α,1α,6α,16β,18-pentamethoxyaconitane(15),14-Benzoylhypaconine(16),(-)-(13R,19S)-11α,19-dihydroxy-N-methyl-13-(S-2-methylbutyryloxy)-2α-hydroxyhetisanium(17),Aconitane-6,8,13,14,15,16-hexol,1-methoxy-4-(methoxymethyl)-20-methyl-,8-acetate 14-benzoate,(1α,6α,14α,15α,16β)-(18),Hokbusine A(19),14-Benzoyldeoxyaconine(20),包括2个新生物碱及18个已知生物碱。继而建立生物碱的含量测定方法,该方法线性关系良好、稳定性好,测定了附子、乌头、白附片、黑顺片中17个生物碱的含量,通过对比17个生物碱在四种药材中的含量差异,得出原材料和炮制品中毒性成分和药效成分的分布情况,炮制过后明显降低了有毒成分的含量。在对玉龙乌头的研究过程中,通过深入挖掘几种不同类型的生物碱标品的质谱裂解途径,总结出一系列规律,如电荷位点效应、氢键效应、电荷远程裂解与电荷迁移裂解之间的竞争途径、以及菱形断裂模式,并将其应用于玉龙乌头的成分分析。据此初步鉴定出了玉龙乌头中124种生物碱,包括85种潜在新化合物和24对异构体。另一方面,为了探讨其解毒的物质基础,对玉龙乌头和附子的化学成分进行比较,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLSDA)对差异标志物进行鉴定。最终鉴定出25个差异性成分,其中14个化合物为玉龙乌头中的特征化合物,大部分C19型二萜生物碱的C-14上具有多样性,对比抗心律失常药物,初步认为苯环上被含氧基团取代的结构可能具有解附子中毒的作用。

摘要译文

关键词: 附子；玉龙乌头 ；生物碱；成分分析；裂解规律

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3. 认领

【学位/硕士】 • 蒲婷婷 • 大理大学 • 导师：段宝忠 • 2023年

摘要：附子为毛茛科植物乌头Aconitum armichaelii Debeaux.的子根加工品,分布广泛,是乌头属中栽培面积最大的种,在四川、陕西、云南、贵州等省份大量种植。由于栽培气候、环境等存在显著差异,导致植物在适应不同环境时产生了变异,形成了各具特色、遗传丰富的种质资源。长期以来,农户凭借传统经验,自由选择生产种质,多种变异类型的种质混杂繁殖,造成生产种源混乱,产量降低、病害严重。因此,种源问题成为了附子产业发展的瓶颈。近年来,种植户迅猛增长,但因耕地的限制,只能选择长期高强度连续种植附子,连作障碍普遍发生,导致土壤酸化、养分失衡、病虫害加剧、产量大幅降低,严重影响种植户的经济收益,成为附子产业化发展的桎梏。鉴于此,本研究采用文献调研和实地考察相结合的方法,对附子栽培种质进行了全面调研;采用高通量测序技术获取附子种质叶绿体基因组序列,结合生物信息学技术,对其结构、序列变异、系统发育关系等进行了研究;采用高效液相色谱技术测定其有效成分和毒性成分含量,结合聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘（OPLS-DA）等方法进行质量差异性评价,并筛选出质量标志物;采用土壤养分检测仪、电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）和高通量测序技术对连作和轮作模式下附子根际土壤的理化性质、微生物群落结构和多样性等进行研究,得到以下研究结果:（1）云南省附子种质资源丰富,栽培范围广泛,主要集中在鹤庆、洱源、维西、玉龙、云龙以及宾川县等地,横跨99.13～100.68°E,25.67～27.18°N,海拔1930.88～2967.17 m。根据表型,可分为4种典型种质:云附1号叶片呈艾叶型、子根长圆锥形、分叉多、芽头较小,不突出,种皮色偏白,生长于云龙、宾川、洱源、维西、鹤庆县等地;云附2号叶片呈南瓜叶型、子根倒圆锥形、几无分叉,芽头较大、向上突出,种皮色偏黑,生长于洱源、云龙、鹤庆和宾川县;云附3号叶片呈艾叶型、子根倒圆锥形、几无分叉,芽头较大、向上突出,种皮色偏黑,仅生长于洱源县;云附4号叶片呈南瓜型、子根长圆锥形、分叉多、芽头较大、向上突出,种皮色偏白,仅生长于鹤庆县。结果表明,不同地理来源的附子可能为同一种质,表型相似;不同种质的附子外型差异明显。且部分附子种质资源流动较少,仅存在极少数地区,缺乏良种选育工作。（2）27批附子的叶绿体基因组全长序列为158,800～155,891 bp,鉴定出131个功能基因,其中86个蛋白编码基因,37个t RNA基因,8个r RNA基因。云附1号全长序列、LSC、SSC和IR区长度分别为155,880 bp、86,347 bp、16,947 bp和53,586 bp,2号为155,858 bp、86,330 bp、16,944 bp和52,854 bp,而3号和4号为155,891 bp、86,359bp、16,946 bp和52,586 bp。提示,可根据叶绿体基因组全长序列、IR、SSC和LSC区的长度,初步区分不同种质。最大似然法结果显示,27批样品分为3个类群:云附1和2号分别聚为明显的单系分支,且具有较高的支持率（100%）;另一个分支包含云附3和4号,互为姐妹类群（100%）。结果表明3和4号可能为同一种质,且不同附子种质相互区分,其中云附1和2号亲缘关系较近,而3和4号亲缘关系更近。（3）层次聚类热图显示,27批样品聚为两大支,但并未按照种类和产地进行聚类。其中,S19、S02、S04、S14、S19、S26和S27聚为第I组;剩余样品聚为第II组。PCA结果显示,27批样品分类较为混乱,未根据种质类型进行聚类;OPLS-DA结果显示,在一定的误差范围内,大部分样品按种质类型可正确分为2组,鉴别准确率为88%;线性判别降维算法发现原始验证模型整体正确率为88.9%,而交叉训练模型仅有59.3%。组质心处函数图结果显示,1、2和4号种质空间分布上有不同程度的重合,3号种质分布相对较远,导致判别准确率下降。结果表明,不同种质间化学成分相似,质量差异较小,但具有各自的特征化合物。（4）附子连作后土壤中速效钾（AK）、总钾（TK）、总磷（TP）、铅（Pb）、铬（Cr）、汞（Hg）含量增加,而铵态氮(HN4+)、铜（Cu）含量降低,砷（As）和镉（Cd）无明显波动;玉米-附子轮作明显降低Pb和Hg的含量,水稻-附子轮作明显降低Cr和Cu的含量,两种轮作模式均能降低土壤中AK,TK和TP的含量。（5）附子连作后细菌群落丰富度和多样性指数Richness、Shannon和Chao1下降;水稻-附子轮作后明显上升,玉米-附子轮作后无明显变化。然而,连作和轮作后真菌群落Richness和Chao1均升高。研究表明,水稻-附子轮作明显改善细菌和真菌群落的物种多样性和丰富度。对于群落结构而言,连作增加变形菌门、担子菌门、拟杆菌门以及致病菌镰孢霉的相对丰度,水稻/玉米-附子轮作降低了这些菌群的丰度。镰孢霉是农作物中常见根腐病的致病菌,提示轮作能有效降低附子患病风险。还发现轮作后细菌共线性网络中负相关边数、模块化和关键类群出现上升,增加细菌网络结构稳定性。此外,连作后土壤固氮作用减弱,影响植株正常生长,而轮作能在增强固氮作用,缓解连作障碍的危害。综上,轮作通过提高微生物丰富度、减少病害菌丰度、增强共线性网络稳定性以及氮循环速率等方面有效缓解附子连作障碍。本研究为附子种质资源的鉴定、优良品种的选育及栽培方式提供重要的理论依据,为附子产业高质量发展奠定研究基础。

摘要译文

关键词: 附子；种质资源；连作障碍；轮作模式；叶绿体基因组；HPLC ；土壤微生物；土壤理化性质

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【学位/博士】 • 尹田鹏 • 云南大学 • 导师：周俊 ; 丁中涛 • 2016年

摘要：乌头属(Aconitum)属于毛茛科(Ranunculaceae),全球约350种,分布于北温带。我国约170种,其中76种民间药用,多用于镇痉、镇痛、祛风湿和解热。二萜生物碱是该属植物的有效成分和毒性成分,也被认为是特征化学成分。二萜生物碱复杂的分子结构和显著的生理活性,吸引着天然药化研究者广泛而持久的关注。本论文第一章至第六章对六种云南产的乌头属植物黄草乌(A. vilmorinianum Kom.)、宾川乌头(A. duclouxii Levl.)、保山乌头(A. nagarum Stapf)、剑川乌头(A. handelianum Comber)、玉龙乌头(A. stapfianum Hand.-Mazz.)和独龙乌头(A. taronense Fletcher et Lauener)的化学成分组成和结构进行了系统的研究。运用多种色谱分离材料和手段,结合现代波谱分析技术和X-单晶衍射技术,从六种乌头属植物中分离鉴定了131个化合物。所得的二萜生物碱有107个,结构类型涉及C18-高乌宁碱型、C19-乌头碱型、C19-7,17-次裂型、C19-牛扁碱型、C20-光翠雀碱型和C20-纳哌啉型,其中有19个新的生物碱,包括两个新颖的二萜生物碱骨架：vilmorine A分离自黄草乌,其B环中C(8)-C(9)键断裂重排为C(8)-C(10)键而形成六元B环；保山乌头中得到的nagarines A和B,其D环C(8)-C(15)键断裂而开环。同时也探讨了这两类新骨架C19-二萜生物碱可能的生源途径。其他16个新化合物分别为1个苯甲酰胺衍生物,1个C18-高乌宁碱型,1个C20-光翠雀碱型,2个C19-重排型及11个C19-乌头碱型二萜生物碱。此外,还对所得二萜生物碱的植物化学分类学意义进行了讨论。第七章对所得部分化合物的抗肿瘤活性和抗氧化活性进行了筛选。第八章归纳总结了2009年至2016年间乌头属植物的研究进展,内容包括最新报道的乌头属中化学成分的结构分类、来源及生物活性等。本研究进一步丰富了乌头属植物二萜生物碱的化学和药理活性研究,进一步为乌头属植物的开发利用提供了科学依据,有利于促进云南省特色药用草乌资源的深入开发和综合利用,同时为乌头属植物化学分类学提供了参考依据。

摘要译文

关键词: 乌头属；二萜生物碱；分离；鉴定；化学分类学

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