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摘要： 对红树植物海杧果内生真菌Penicillium sp.发酵液的乙酸乙酯提取物进行了柱层析分离,得到3个化合物,经MS,NMR,1H-1H COSY,HMQC和HMBC等鉴定,分别为4-(3-hydroxybutan-2-yl)-3,6-dimethyl-benzene-1,2-diol(1),4-(3-hydroxybutan-2-yl)-3-methyl-6-acetylbenzene-1,2-diol(2)和3,4,5-trimethyl-1,2-benzenediol(3).其中化合物1和2为新化合物,化合物3为新的天然产物.抗菌活性测试结果表明,化合物1和3均具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的活性,化合物2则未显示此活性.
关键词: 红树林植物 ；内生真菌 ；Penicillium ；sp. ；抗菌活性 ；化学成分
被引量
39
摘要： 目的红树植物角果木内生真菌Penicillium sp.J54大米固体培养基发酵的次生代谢产物的研究。方法采用多种色谱技术进行分离纯化,并根据化合物的理化常数、核磁和质谱数据进行结构鉴定;通过滤纸片琼脂扩散法进行体外抗菌活性测试;通过Ellman比色法进行乙酰胆碱酯酶抑制活性测试。结果从Penicillium sp.J54的大米固体培养基发酵产物中分离得到了6个化合物,分别鉴定为methyl 2-hydroxy-2-(5-hydroxy-2,7-dimethyl-4-oxo-4H-chromen-3-yl)acetate(1)、coniochaetone B(2)、dihydrocitrinone(3)、asperbiphenyl(4)、erythro-11α-hydroxyneocyclocitrinol(5)和麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(6)。活性测试结果表明化合物3,4和6对烟草青枯病原菌具有微弱的抑制活性,而化合物2则对乙酰胆碱酯酶有较强的抑制活性。结论化合物1为新化合物,4为首次从青霉菌中分离得到。
关键词: 内生真菌 ；角果木 ；化学成分 ；生物活性
被引量
11
摘要： 为研究红树林植物卤蕨(Acrostichum aureurm)内生真菌Penicillium sp.0935030发酵物中的抗菌活性成分,采用活性追踪的方法,用多种色谱技术对化合物进行分离纯化,通过理化性质和光谱数据鉴定出7个化合物,分别为:环(脯氨酸-苏氨酸)(1),环(脯氨酸-酪氨酸)(2),1-呋喃基-1,2-乙二醇(3),(3β,4β,22β)-12-烯-3,22,23-三羟基-齐墩果烷(4),甘露醇(5),尿苷(6)和甘草素(7)。以上化合物均为首次从该真菌中分离得到。用滤纸片琼脂扩散法测定上述化合物的抗菌活性,其中化合物1、2和7具有明显抗金葡菌和耐甲氧西林金葡菌活性。
关键词: 卤蕨 ；内生真菌 ；青霉属 ；环二肽 ；抗菌活性
被引量
65
摘要： 红树林植物(Mangrove plants)是一类非常独特的海洋生物,由于其所处的特殊生境,不仅使红树植物演生出特殊的次级代谢产物生物合成途径,而且为红树林内生真菌提供了特殊的宿主环境,使红树植物内生真菌种类丰富,构成了海洋真菌的第二大生态群。角果木Ceriopstgal作为民间药用植物,其化学成分的研究一直受到关注,角果木内生真菌较于红树科其它植物内生真菌被研究较少,其内生真菌多样性还未被系统发掘。本研究选取了角果木为研究对象,从3个不同采样点、5个不同器官组织对角果木内生真菌进行系统发育研究和多样性分析,对角果木及其内生真菌中获得的代谢产物进行分离、结构鉴定和生物学评价,以期为开发新的红树林天然药物资源提供新思路。(1)从角果木的975个组织块中分离到内生真菌408株,采用分子生物学的手段结合形态鉴定,初步确立其分类地位。将164个形态型归属于真菌界2个门,5个纲,10个目,23个属,45个种。其中23个形态型鉴定到属,1个形态型未确定分类地位。所鉴定真菌中子囊菌门Ascomycota占97.8%,担子菌门真菌Basidiomycota占2.2%。与之前角果木内生真菌研究结果相比,本研究中3个采样地的角果木内生真菌多样性更为丰富。角果木内生真菌定殖率、与分离率受宿主不同部位器官的影响比地理位置影响更加明显。A采样地定殖率与分离率均是花>胚轴>枝>根>叶,B采样地定殖率与分离率均是花>枝>根>叶,C采样地定殖率与分离率均是胚轴>枝>根>叶。总体表现为定殖率与分离率均是花(胚轴)>枝>根>叶。宿主生境(海水盐度)和宿主器官部位对生物多样性与物种丰富均有影响,3个采样地香浓指数(H')和物种丰度均是A(海水盐度为19‰)>C(海水盐度为16‰)>B(海水盐度为11‰),基本表现出一定范围内海水盐度越高,内生菌有更高的物多样性与物种丰富度,当然这一规律仍然需要更多的研究案例来验证。角果木内生真菌群落组成在不同采样地和不同器官间均存在差异,不同器官之间差异更明显。A采样点的最优势目是炭角菌目Xylariales,最优势属是拟盘多毛孢属Pestalotiopsis,最优势种是忽视拟盘多毛孢Neopestalotiopsis chrysea;B、C采样点的最优势目肉座菌目Hypocreales,最优势属是镰孢菌属Fiusarium,但最优势种分别为层出镰刀菌Fusarium proliferatum和木贼镰刀菌Fusarium equisetf。从不同器官方面,根和枝的最优势目为炭角菌目Xylariales,葡萄座腔菌目Botryosphaeriales为叶片中的最优势目,胚轴的最优势目为肉座菌目Hypocreales,煤炱菌目Capnodiales则是花的最优势目;根、枝、叶、胚轴、花的最优势属分别是壳梭孢属Neofusicoccuum、炭疽菌属Colletotrichum、多节孢属Nodulisporium、镰孢菌属Fusarium和枝孢菌属Cladosporium。在所分离鉴定出的内生菌中,只有Fusariumproliferatum、Pestalotiopsis microspora、Colletotrichum gloeosporioides、Aspergillus sydowii 几种真菌在同时从 3个采样地分离到。还没有发现在所有器官都存在的菌种,多数内生真菌都表现出宿主器官的偏好性和对宿主生活环境的选择性。如Fusarium oxysporum只从C采样点的胚轴中分离到。Phellinus noxius只定殖于B采样点叶片中,Cytospora sp.只从A采样点枝条中分到等。(2)用乙醇浸泡后,通过超声提取法获取角果木胚轴有效成分。通过反复过正相硅胶柱、反相硅胶柱和葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)柱层析、HPLC等手段,从角果木胚轴二氯甲烷段和石油醚段分离得到单体化合物分离获得23个单体化合物。通过波普解析手段(1H-NMR、13C-NMR、DEPT-135、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、ESI-MS、EI-MS)以及对文献的参照对比,鉴定出其中14个化合物结构式。其中包含11个三萜类化合物(化合物1-3,5-11),1个倍半萜(化合物4)和2个甾体类化合物(12、13)。并且首次从角果木中分离到倍半萜类化合物。(3)通过有效的抗菌活性筛选得到目标菌株Cytospora sp.(MG948459),使用优化的培养基将目标菌株进行下一步发酵产物的提取和分离。获得28个单体化合物。采用波普分析技术(1H-NMR、13C-NMR、DEPT-135、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、ESI-MS、HR-ESI-MS、LC-MS)对分离得到的单体化合物进行深入研究,并结合参考文献加以比对,鉴定出18个化合物的结构式。包含有3个倍半萜类化合物(C1、C13、C14),5个酚类化合物(C6、C10、C11、C12、C15),6个甾体类化合物(C5、C7、C8、C9、C16、C17),1个吡喃酮类化合物(C3),1个苯并呋喃酮(C4)和2个异香豆素类化合物(C2、C18)。其中化合物C1、C2、C3为新化合物,化合物C13、C14为一对反顺异构体。(4)所将角果木及其生真菌代谢Cytosporasp.所得单体化合物进行生物学活性评价。分别选取动物病原菌大肠杆菌E.coli、铜绿假单胞菌P.aeruginosa、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、白色念珠菌CAlbicans和植物病原菌胶孢炭疽菌C.gloeosporioides、稻瘟病菌M.oryzae、芽孢枯草杆菌及subtilis等8个菌株作为指示菌株,肝癌细胞HepG2作为指示细胞进行抗菌和抗肿瘤筛选。其中角果木胚轴化学成分中具有抑菌作用的成分(化合物13、3、6、7、11)占所有化合物的50%;Cytospora sp.代谢产物中具有抑菌作用的真菌代谢产物(化合物C6、C7、C9、C1、C2、C4、C12、C13、C14、C15、C16)占所有化合物的73%,证明之前对菌株进行的抗菌活性筛选有效。化合物C11对肝癌细胞HepG2具有较强抑制作用,其ICs0值达到3.50±0.68μg/mL,比阳性(5.66±0.48μg/mL)对照更强。值得进一步研究。
关键词: 角果木 ；胚轴 ；内生真菌 ；多样性 ；Cytospora sp. ；代谢产物 ；生物活性
被引量
2
摘要： 木果楝（Xylocarpus granatum Koenig）为楝科木果楝属乔木或灌木,是红树林主要树种之一,分布于印度、越南、中国和马来西亚沿海地带,在我国只有海南省有生长。木果楝作为民间药物,主要用来治疗痢疾、霍乱、发热以及用作抗虫剂。国内外学者对木果楝化学成分进行了系统的研究,而木果楝内生真菌相关研究报道较少,为了进一步开发和利用濒危木果楝资源,本文以木果楝内生真菌作为研究对象,期望从中得到结构新颖、活性显著的先导化合物。本论文以两株海南药用红树林来源的内生真菌Talaromyces flavus TGGP35和Phomopsis sp.MGF222为研究对象,综合运用现代色谱分离方法和鉴定技术从其次级代谢产物中分离并鉴定了57个单体化合物的结构。从T.flavus TGGP35中分离得到42个单体化合物（1-42）:11个异香豆素类化合物（1-11）,3个混元萜类化合物（12-14）,5个内酯类化合物（15-19）,4个甾酮类化合物（20-23）,7个苯类衍生物（24-30）,7个含氮类化合物（31-37）,5个其它类化合物（38-42）;其中1和2为新化合物。从Phomopsis sp.MGF222的发酵产物中共分离得到15个单体化合物（43-58）:7个甾酮类化合物（42-49）,8个其它类化合物（50-57）;其中50为新化合物。部分化合物的抗氧化活性、抗菌活性和α-Glucosidase抑制活性测试结果表明:化合物8、20、25、43、44、45、48具有明显的的抗氧化活性,IC50值分别为13.44、19.51、12.42、19.75、18.52、19.21和17.56μM;化合物46对C.albicans、S.aureus显示微弱的抗菌活性,MIC值分别为12.5和6.25μg/m L;化合物29对S.aureus、M.luteus、B.cereus和S.epidermidies均有微弱的抗菌活性,MIC值分别为6.25、3.13、6.25和3.13μg/m L;化合物47对S.aureus具有良好的抗菌活性,MIC值为6.25μg/m L;化合物14有显著的α-Glucosidase抑制活性,IC50值为306.4μM,强于阳性对照Acarbose(IC50=313.9μM)。本研究从两株内生真菌中分离获得了系列异香豆素类和系列甾酮类化合物,通过生物活性测试筛选出了具有α-Glucosidase抑制活性、抗氧化活性和抗菌活性的化合物,为糖尿病、抗氧化、抗菌药物的研发提供理论依据与物质基础,同时对药用红树植物资源的保护和功能开发都具有重要意义。
关键词: 木果楝 ；内生真菌 ；次级代谢产物 ；生物活性
会议名称： 第九届全国青年药学工作者最新科研成果交流会
会议时间： 2008-05-01
摘要： 海洋红树植物为自然分布于热带、亚热带海岸潮间带的木本植物群落,通常生长在港湾河口地区的淤泥质滩涂上,具有水陆两栖的特性。红树植物处于水分高、盐分高、氧气缺乏的特殊生态环境中,其自身及内生菌较之其它生态系统有很大的不同.为了从红树林植物及其内生菌中发现结构新颖的活性海洋天然产物,寻找具有显著生物活性的药物先导化合物,以及研究红树植物和其内源性微生物化学成分的相关性,我们对红讨植物桐花树(Aegiceras comiculatum)及其内生真菌(I.~T20026122)进行了化学成分研究及药理活性筛选,同时对抗肿瘤活性化合物的作用机理进行初步探讨。
以抗肿瘤活性筛选为指导,利用现代色谱方法和波谱学技术,我从桐花树的活性部位-石油醚部分中分离并鉴定了22个化合物,其中有7个新化合物(图1),分别命名为：5-氧-乙基信筒子醌(1),2-氧-乙酰基-5-氧-甲基信筒子醌(2),3,7-二羟基-2,5-十-烷基萘醌(3),2,7-二羟基-8-甲氧基-3,6-十-烷基-二苯并呋喃-1,4-二酮(4),2,8-二羟基-7-甲氧基-3,9-十一烷基-二苯并呋喃-14-二酮(5),10-羟基-4-氧-甲基-2,11-十一烷基-gomphilactone(6),2-甲氧基-3-壬烷基间苯二酚(7).5-氧-乙基信筒子醌(1)和5-氧-甲基信筒子醌对人肿瘤细胞U937,HL-60,Bel7402和Hela的生长抑制作用较强,其IC50值在4.11μM到12.40μM之间,在此浓度范围内正常细胞PtK2的存活率较高约为90％。
两化合物可使HL-60细胞的周期阻断在Go/G1期,并能够诱导HL-60细胞凋亡.在给药浓度为100μM时,两化合物可以使Hela细胞微管蛋白完全解聚,其诱导凋亡的机制可能与促进微管蛋白解聚有关.采用计算机浦助设计的方法对化合物和微管蛋白进行了分子对接模拟,5-氧-乙基信筒子醌(1)和5-氧-甲基信筒子鲲有可能和秋水仙碱具有相同的作用模式。
从桐花树内生真菌GT20026122(Penicillium sp.)发酵液和菌丝体中分离并鉴定了定了33个化合物,特别是一系列结构新颖的吲哚三萜类生物碱(图2),其中新化合物8个,分别命名为shearinines D-K(8-15)。
首次采用量子化学圆二色散图谱计算的方法,对该类生物碱的绝对构型进行了确定,并发现化合物shemrininesD(8),E(9),G(11)对大电导钙离子激活钾离子通道具有阻断作用。
通过本课题,我们对海洋红树植物桐花树及其内生真菌进行了化学研究,鉴定结构新颖的海洋天然产物15个,对多数化合物进行抗肿瘤、抗病毒、抗菌和酶抑制活性筛选,发现具有抗肿瘤作用的活性化合物2个,并对其抗肿瘤机理进行了初步研究,钾离子通道阻断剂3个.该植物的次生代谢产物明显具有紫金牛科特点,其内生菌次生代谢产物也明显具有Penicillium属真菌特点,但未发现植物成分与微生物成分的相关性。从同一植物中分离得到的内生菌可达上百种,本文仅对一种微生物进行了研究,尚不能说明问题,其它菌种的微生物的比学成分有待于进一步研究。
关键词: 海洋红树植物 ；桐花树 ；内生真菌 ；次生代谢产物 ；抗肿瘤活性 ；微管蛋白
被引量
2
摘要： 人们已经从内生真菌中分离到各种各样的生物活性化合物和独特的化学结构,它们在农业、医药和工业中具有较高的开发潜力。海洋微生物作为一个重要的组成部分,海洋真菌代谢产物的多样性越来越被人们认可和接受。红树林真菌作为第二个最大的海洋真菌生态群,人们已经意识到,它们在红树林适应性方面具有非常重要的作用,且在新产品的筛选中他们也被认为是很有前途的来源。目前为止,有关中国红树植物角果木(Ceriops tagal)内生真菌的研究还鲜有报道。本研究以角果木为材料,从其根、叶、枝中共分离得到95株内生真菌,并对所分离得到的内生真菌进行初步形态学鉴定和抗菌活性筛选。对其中活性比较强的J3和J62菌株,在次生代谢产物的分离鉴定与活性筛选等方面做了较为系统的研究。
对中国红树植物角果木中分离得到95株内生真菌,依据其显微特征和菌落形态,将其中94株真菌归为半知菌类,即产孢的28株鉴定为13个属,其中青霉属(Penicilliumsp.)、镰孢霉属(Fusarium sp.)和枝顶孢霉属(Acremonium sp.)为优势属,剩下未产孢的66株真菌暂归为无孢菌群,还有1株属于担子菌纲。结果表明,中国红树植物角果木树叶的真菌在种群、数量及其组成方面与根、枝相比存在较大差异,此结果表明角果木内生真菌对其宿主植物具有一定的组织专一性。
对95株角果木内生真菌进行了抗菌活性和抗肿瘤筛选。结果显示,有7株具有抗金黄色葡萄球菌的活性,3株具有抗MASR的活性,有8株内生真菌至少对一种指示瘤株具有细胞毒活性,6株内生真菌对烟草青枯病原菌有抑制作用。这表明角果木内生真菌是寻找有价值的生物活性成分的潜在资源,其生物活性成分值得进一步研究。
采用多种柱色谱技术对化合物进行分离纯化,通过理化性质及现代波谱技术(MS, IR, UV,1D-和2D-NMR等)鉴定化合物的结构,经MTT法进行体外细胞毒活性筛选及滤纸片法进行抗菌活性测试。
从角果木叶片内生真菌J3发酵液中共分离得到11个化合物,分别是：2a-hydroxylxylaranol B (1),4β-hydroxylxylaranol B (2),1,3,5-trihydroxy-4-methoxy-xanthone(3), dihydropenicillic acid (4),1-methyl emodin (5),3,4-seco-sonderianol (6), cyclo(L-prolinyl-L-tyrosine)(7),2'-deoxythymidine (8),(3S,20S)-20-(propylamino-methyl)-pregn-7-en-3-ol (9), quinoline (10), uracil(11)。从内生真菌J62发酵液中共分离鉴定了10个化合物,分别为similin B (12), trans-cinnamicacid (13),3,4-dimethoxybenzyl alcohol (14),2-[(3,4-dimethoxyphenyl)methyl]-4,5-dimethoxy-benzen-emethanol (15), coibanol C(16), uridine(17),5,8-epidioxy-5a,8a-ergosta-6,22E-dien-3b-ol(18), stigmasta-7,22-diene-3b,5a,6a-triol (19), hymatoxin C (20)知crispin A (21).其中,化合物1和2为新的愈创木烷型倍半萜,化合物9为新天然产物；所有化合物均为首次从该角果木内生真菌中分离得到。
采用MTT法测定化合物的细胞毒活性,结果显示化合物3,6,7,12和14对人慢性髓原白血病细胞K562显示有生长抑制活性,化合物6对人肝癌细胞BEL-7402、人胃癌细胞SGC-7901和人慢性髓原白血病细胞K562三种指示瘤株均有细胞毒活性。采用滤纸片琼脂扩散法测定化合物的抗菌活性,结果显示化合物3,4,5,6,13,14和20具有抗金黄色葡萄球菌活性,化合物7,13和14具有抗白色念珠菌的活性。
关键词: 角果木 ；内生真菌 ；次生代谢产物 ；结构鉴定 ；抗菌活性
被引量
1
摘要： 海洋红树内生真菌是一类特殊微生物,高盐分、高温度、低氧量的环境使这类微生物产生自身专有的代谢途径。曲霉属真菌作为其中主要优势菌株之一,能在其代谢历程中产生和积存大量结构新颖、活性显著的代谢产物,对医药的开发具有积极推动作用。本论文对源于海洋红树植物组织的四株内生真菌Fusarium sp.R5、Aspergillus clavatus R7、Trichoderma sp.09、Fusarium sp.L5次级代谢产物进行化学成分研究,分别以乙酸乙酯和正丁醇对四株内生真菌的固体培养基发酵物进行萃取,综合运用正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、薄层层析以及制备液相等多种分离纯化技术,共分离得到31个单体化合物。主要通过核磁共振波谱、高分辨质谱、红外光谱和紫外光谱等波谱学技术以及对照文献鉴定了它们的结构,结果如下:从内生真菌Fusarium sp.R5的代谢产物中分离得到10个化合物:5-羟甲基-2-呋喃甲醛(1)、(3R,4R)-顺-4-羟基蜂蜜曲菌素(2)、(3R,4R)-顺-4,7-二羟基蜂蜜曲菌素(3)、酒渣碱(4)、β-谷甾醇(5)、3β-胆甾-5-烯-3-醇(6)、丁二酸(7)、顺丁烯二酸(8)、麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3酮(9)、Clavatol(10);从内生真菌Aspergillus clavatus R7的代谢产物中分离获得13个化合物:24-羟基麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮(11)、4-(γ,γ-二甲基烯丙氧基)-9,10-二甲基-2-羟基苯乙酮(12)、4,4'-二甲氧基-5,5'-二甲基-7,7'-氧联双香豆素(13)、7-羟基-4-甲氧基-5-甲基香豆素(14)、7-(γ,γ-二甲基烯丙氧基)-4-甲氧基-5-甲基香豆素(15)、Kotanin(16)、Orlandin(17)、Clavatustides A(18)、Clavatustides B(19)、胸腺嘧啶(20)、黄嘌呤(21)、尿囊素(22)、L-阿拉伯糖醇(23);从内生真菌Trichoderma sp.09的代谢产物中分离获得4个化合物:Dichlorodiaportinolide(24)、Dichlorodiaportin(25)、Diaportinol(26)、Diaporthin(27);从内生真菌Fusarium sp.L5的代谢产物中分离获得4个化合物:2-羟基-3-苯基-1-环戊烯-2-酮(28)、(S)-5-羟基-2,6-二甲基-4H-呋喃[3,4-g]苯并吡喃-4,8(6H)-二酮(29)、曲酸(30)、7,8-二甲基苯并蝶啶-2,4(1H,3H)-二酮(31)。其中化合物11,12,13,15,24,29是未见文献报道的新化合物,还包括新天然产物28。在已知化合物中,化合物14,20,21,22为自Aspergillus sp.属中首次分离获得,化合物2,3,4,10,31为自Fusarium sp.属中首次分离获得。其次对分离得到的部分化合物进行了抗菌活性、抗氧化活性和细胞毒活性研究。纸片扩散法抗菌活性实验表明,在质量浓度为250μg/m L时,化合物4呈现出对香蕉炭疽菌高度抗菌活性,对番茄枯萎菌和小麦赤霉菌中度抗菌活性。二倍稀释法抗真菌实验发现,化合物11对番茄枯萎菌、香蕉炭疽菌和柑橘青霉菌表现出高度抗菌活性(MIC≦50μg/mL),化合物10,17对番茄枯萎菌表现出明显的抗菌活性;抗细菌实验发现,化合物9,10对大肠杆菌有较高的抗菌活性(MIC值分别为20μg/mL、35μg/m L)。DPPH自由基清除法抗氧化活性实验发现,化合物9,11均表现出较弱的抗氧化活性。MTT法细胞毒活性实验发现,化合物9,11对肝癌细胞(HepG2),卵巢癌细胞(OVCAR-3),乳腺癌细胞(MDA-MB-231)生长具有中度抑制活性,化合物12对肝癌细胞(HepG2)生长具有中度抑制活性,并且化合物9,11,12,13,14,15,17对这三种癌细胞的细胞毒活性研究属首次报道。本论文对四株红树内生真菌代谢产物进行分析解析,并展示部分化合物具有较显著的抗植物病原菌、细菌等活性,推动了海洋红树微生物代谢产物的研究发展。
关键词: 内生真菌 ；曲霉属 ；代谢产物 ；分离鉴定 ；生物活性
被引量
1
摘要： 近海潮间带植物生境生存着大量至今尚未认识的新种属微生物,是最富有生物多样性的海洋微生物种群,具有开发新药的巨大潜力。本文对南北方近海潮间带盐生植物生境中的微生物资源进行了系统研究。
采集了南海海域23种红树植物及渤海海域8种盐生植物的叶、茎、树皮、根等不同部位及其根际土壤样品,通过加入诱导剂、保护剂、抑制剂、模仿野生生境、改善营养成分等方法,对真菌与放线菌的分离方法进行了研究,确定了最佳分离方法,该方法比传统分离方法分离得到的真菌与放线菌数量分别提高了40%和100%。共分离得到微生物1249株,包括真菌632株,细菌242株,放线菌375株。
对分离得到的部分菌株进行了抗菌、抗肿瘤及杀虫活性测试,研究了不同植物种类及不同微生物类型活性菌株的分布情况,结果发现细菌菌株中,具有抗菌或杀虫活性的菌株比例较大,红树附生、内生真菌具有抗肿瘤活性的比例较高,不同红树植物树种及同一植物不同部位对微生物活性菌株的数量及类型影响较大,从红树植物老鼠簕附生菌中筛选出3株兼有抗菌、抗肿瘤及杀虫活性的菌株,显示了很好的开发利用价值。
通过对有活性微生物菌株的形态学观察,生理生化观察及分子生物学鉴定,对部分药用菌株进行了分类鉴定。结果显示,近海潮间带环境中,有活性的真菌大多集中在丛梗孢科的青霉属(Penicillium sp.),占真菌总数的27%,其次是曲霉属(Aspergillus sp.)及头孢霉属(Cephalosporium sp.),均占真菌总数的15%。活性细菌以革兰氏阳性菌居多,大多属于芽孢杆菌(Bacillus sp.)和弧菌(Vibrio sp.),分别为55%和18%,研究结果为药用微生物资源库的建立奠定了基础。
关键词: 近海潮间带植物生境 ；药用微生物 ；分离与活性筛选 ；鉴定
被引量
6
摘要： 近年来,随着研究热点的转移,新药的研究开发已突破了陆生资源的束缚,拓展到了生态和物种远比陆地生境复杂多样的海洋。红树植物生长于海岸潮间带,其独特的生存环境赋予它丰富的微生物资源,是当前倍受重视的药用新资源。
本文对福建省九龙江口浮宫镇草埔头红树林区木榄(Bruguiera gymnorrhiza)和秋茄(Kandelia candel) 2种红树植物的内生真菌资源进行为期1年的种群动态调查并对这些菌株的抗菌、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶及胰蛋白酶抑制剂活性进行了初步研究。对活性菌株A-1-2-3的代谢产物进行分离纯化并对分离得到的化合物进行结构鉴定和生理活性研究,为深入开发和保护红树植物内生真菌药用资源提供理论依据,并期望得到有开发前景的候选药物先导化合物。
从2种红树植物的树叶、树皮和树根样品中分离到290株内生真菌。对其种群动态进行初步考察,结果显示,木榄和秋茄内生真菌数量高峰期分别为4月份和10～12月份;青霉(Penicillium)、交链孢(Alternaria)、Diaporthe和无孢目(the nonsporulating groups)是秋茄中的主要优势属;木榄内生真菌主要优势属为头孢霉(Cephalosporium)、交链孢、青霉等。不同宿主对内生真菌的季节分布有重要的影响。以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、白色假丝酵母(Candida albicans)、黑曲霉(Aspergillus niger)为指示菌,采用琼脂扩散法对这些菌株进行抗菌活性检测,共筛选得到活性菌株40株,占总菌株数的13.8 %;采用MTT法对其体外抗肿瘤活性进行检测,发现17株内生真菌对KB(人口腔上皮癌)和/或Raji(人B淋巴瘤)细胞具有抑制作用,占总菌株数的5.9 %。生物活性菌株分布于青霉、交链孢、拟青霉、无孢目等10个不同的分类单元中,2种宿主植物内生真菌抗菌及抗肿瘤活性均有不同程度的季节差异性。
菌株A-1-2-3分离自秋茄植物的叶子,经分子鉴定为一株拟茎点霉(Phomopsis sp.)。本文采用固体培养、有机溶剂提取、分相萃取、柱层析、和重结晶等分离纯化方法从其发酵产物中分离到9个纯的化合物(Y6,A4,A3,Y29,Y10,A5,Y9,A1和SRS39),并采用核磁共振(NMR)波谱解析结合电喷雾质谱(ESI-MS)的方法鉴定其结构,经数据库搜索,发现有5个结构
关键词: 红树植物 ；内生真菌 ；次级代谢产物 ；拟茎点霉
被引量
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