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摘要： 目的研究长胜七的化学成分及其细胞毒活性。方法长胜七80%乙醇提取物采用硅胶、sephadexLH-20及RP-HPLC半制备进行分离纯化,通过^(1)H-NMR、^(13)C-NMR以及质谱鉴定化学结构,采用MTT法测定化合物的细胞毒活性。结果从长胜七中分离得到9个简单苯丙素类化合物,分别鉴定为:lawsorosemarinol(1),肉桂酸(2),erythro-7-methoxyguaiacylglycerol(3),erythro-1-(3-methoxy-4-hydroxy-phenyl)-propan-1,2-diol(4),3-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-propan-1,2-diol(5),threo-1-(3-methoxy-4-hydroxy-phenyl)-propan-1,2-diol(6),C-veratroylglycol(7),guaiacylglycerol(8),erythro-guaiacylglycerol(9),化合物3对HCT116细胞株具有细胞毒活性,IC_(50)值为(20.40±1.37)μM。结论化合物1~5,8,9首次从华中五味子植物中分离得到,化合物3具有细胞毒活性。
关键词: 长胜七 ；化学成分 ；简单苯丙素 ；肉桂酸 ；细胞毒活性
被引量
7
摘要： 离子色谱是用于分离分析不同基质样品中离子性物质的一种新型高效液相色谱技术。自1975年发展至今,已被广泛应用于环境、能源、食品、医药等多个领域,具有操作简单、分析快速、灵敏度和选择性高,且能同时分离测定多种组分等优点。近年来,随着离子色谱技术自身迭代发展,可测定分析的样品种类已包括离子、糖类、氨基酸、有机酸(碱)等,同时离子色谱法也越来越成为针对中草药复杂组分中单个有效成分分析与鉴定的重要手段。本文介绍了离子色谱技术的不同类型、原理及研究进展,整理了近几十年离子色谱在中草药糖苷类、氨基酸、蛋白质、无机盐以及有机酸、生物碱类和黄酮类等复杂成分中的应用情况;检索文献发现,离子交换色谱、电导检测法为离子色谱中最常用的技术类型和检测方式,且目前离子色谱在生物碱类成分分析中的应用展现出较传统分析方法更好的优势,但在无机阴离子的形态分析和黄酮类、苯丙素类、甾体类等主要活性物质中的直接应用研究报道较少。最后,综述了离子色谱(联用)新技术及其在中草药中的最新进展,并对该色谱方法未来在复杂组分分离分析方面的应用进行了探讨和展望,为离子色谱技术分析中草药复杂化学成分的进一步发展提供理论参考。
关键词: 离子色谱 ；中草药 ；复杂组分 ；成分分析
被引量
7
摘要： 目的 研究唇形科中药亚类化学成分与其药性之间的相关性,并建立寒热药性判别预测模型。方法 从《中华本草》中收集123种有明确寒热记载的唇形科中药,按照微凉、凉、微寒、寒及大寒和微温、温、热及大热将其分为寒热两大类,采用二元Logistic模型筛选出与其寒热药性相关的化学成分,采用支持向量机(SVM)建立机器学习的预测模型。结果 单萜类和简单苯丙素类与唇形科中药寒热药性之间存在强关联性(P<0.05),利用SVM建立的唇形科中药药性判别预测模型对培训集样本总体判别率达89.66%,对测试集样本总体判别率达到77.78%,具有良好的预测效果。结论 基于SVM的数据挖掘模型可用于唇形科中药与其寒热药性之间的相关性的研究。
关键词: 支持向量机 ；寒热药性 ；判别研究
被引量
6
摘要： 目的:采用超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术快速鉴定小金丸中的化学成分,构建较为全面的小金丸化学成分谱,为小金丸药效物质基础研究奠定基础。方法:UPLC-Q-TOF-MS分析采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(Waters,2.1 mm×100 mm,1.7μm)超高效液相柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱;飞行时间质谱采用正、负离子模式扫描,质谱数据以MSE模式采集。UPLC-Q-TOF-MS分析依据离子峰的保留时间、精确分子质量和多级质谱碎片,与文献报道数据和数据库对比,对小金丸的甲醇提取部分化学成分进行在线快速鉴定。GC-MS分析采用Agilent 19091S-433 HP-5MS 5%Phenyl Methyl Silox(Agilent,30 m×250μm×0.25μm)毛细管色谱柱,载气为氮气;质谱采用EMV模式:增益因子1.00。GC-MS分析通过增强型NIST4.L标准质谱库进行检索,对小金丸中挥发性成分进行了快速鉴定。结果:从小金丸中共鉴定化学成分118种,主要包括生物碱类24种、有机酸12种、甾体类9种、单萜类5种、倍半萜类16种、二萜类14种、三萜类7种和苯丙素类成分5种,另外还有个别酯类、糖类、氨基酸类和杂环类化合物等。结论:UPLC-Q-TOF-MS和GC-MS方法能快捷、准确、较全面地鉴定小金丸中的化学成分,为小金丸药效物质基础研究提供科学依据,并为中药复方的成分鉴定提供了一种简单快捷的分析鉴定方法。
关键词: 小金丸 ；化学成分 ；UPLC-Q-TOF-MS ；GC-MS ；药效物质基础
被引量
12
摘要： 目的总结山楂核的化学成分、药理作用及应用情况,为其进一步研究奠定基础。方法对56篇山楂核相关文献进行研究,整理归纳山楂核化学成分、药理作用及应用研究进展。结果山楂核化学成分主要为木脂素类、简单苯丙素类、黄酮类、挥发性组分和其他类成分。山楂核提取物及其成分具有抗氧化、调节血脂、抗菌、抗肿瘤、抗炎和神经保护等药理作用;此外,山楂核干馏油已应用于生产食品添加剂和抗菌消毒产品。结论山楂核所含化学成分丰富,药理作用多样,在预防和治疗心脑血管疾病、消化道疾病、抗衰老等方面具有广阔的发展前景。
关键词: 山楂核 ；化学成分 ；药理作用 ；应用
被引量
46
摘要： 目的基于UPLC-QTOF-MS系统解析小儿消积止咳口服液物质组。方法采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,柱温40℃,体积流量0.4 mL/min,进样量5μL;质谱条件为XEVO-G2 QTOF质谱仪,电喷雾离子源,正、负离子模式扫描。结果通过对照品确认、高分辨质谱数据分析及文献检索比对,共鉴别出108个化学成分,包括37个黄酮类、11个生物碱类、13个三萜类、4个木脂素类、2个香豆素类、5个简单苯丙素类、4个苯乙醇苷类、14个有机酸类以及18个包括氨基酸、聚炔类等其他化学成分。结论建立的方法可系统、准确、快速辨识小儿消积止咳口服液中多种化学成分,为后续对口服液质量及药效研究提供物质基础。
关键词: 小儿消积止咳口服液 ；UPLC-Q/TOF-MS ；化学物质组 ；黄酮类 ；生物碱类 ；三萜类
被引量
21
摘要： 目的研究辛味唇形科中药化学成分的特征规律,并建立辛味药性判别预测模型。方法从《中华本草》中收集64种对“五味”有明确记载的唇形科中药,将属于酸味、苦味、甘味、咸味中药记为“不是辛味”中药类,属于辛味的中药为“辛味”中药类,用支持向量机(SVM)构建辛味药性判别预测模型。结果倍半萜类化学成分、倍半萜类化学成分和单萜类化学成分、倍半萜类化学成分和简单苯丙素类化学成分三种组合的提升度最高,表现出与辛味药性的强关联性,利用SVM建立的唇形科中药辛味药性判别预测模型对培训集样本判别率达100%,对测试集样本判别率达到94.74%,具有良好的预测判定效果。结论基于SVM的分类模型能实现唇形科中药辛味药性的高效判别。
关键词: 支持向量机 ；唇形科中药 ；辛味药性 ；模式识别
被引量
6
摘要： 为了使民族药半枫荷得到更好合理开发,对其化学成分及药理作用进行了简单综述。半枫荷(Semiliquidambar cathayensis.)是中国特有的药用植物,治疗风湿类疾病的效果良好,含有丰富的黄酮类、生物碱类、萜类、苯丙素类等多种活性成分,现代药理研究也表明半枫荷具有抗炎镇痛、活血化瘀、抗氧化、抗菌、抗病毒等作用,用途广泛。该综述可为半枫荷的合理开发利用提供参考依据。
关键词: 半枫荷 ；化学成分 ；药理作用
被引量
8
摘要： 目的:研究山柰根茎的化学成分。方法:采用硅胶柱、凝胶柱、MCI、ODS以及半制备HPLC等各种色谱分离手段对山柰根茎95%EtOH提取物进行分离纯化。并运用MS、NMR等波谱数据方法对化合物的结构进行鉴定。结果:从山柰根茎中共分离得到15个化合物,包括5个苯丙素类化合物,反式肉桂酸乙酯(3)、反式对甲氧基肉桂酸乙酯(4)、反式对甲氧基肉桂酸(5)、顺式对甲氧基肉桂酸乙酯(6)、阿魏酸(7);4个简单芳烃类化合物,对甲氧基苯甲酸(1)、对羟基苯甲酸(2)、苯甲酸(8)、邻苯二甲酸二丁酯(9);4个脂肪酸类化合物,5-癸烯酸(10)、硬脂酸(11)、单棕榈酸甘油(12)、柠檬酸三甲酯(13);2个黄酮类化合物,山柰酚(14)、木犀草素(15)。结论:化合物1、7、9、10、12和13均为首次从该植物中分离得到;化合物10为首次从山柰属植物中分离得到。
关键词: 山柰 ；山柰属 ；化学成分
被引量
5
摘要： 穿骨七是毛茛科(Ranunculaceae)银莲花属(Anemone)植物阿尔泰银莲花(Anemone altaica Fisch.ex C.A.Mey)的根茎,具有化痰开窍,安神等功效,主要用于多梦健忘,胸闷腹胀的治疗,在民间使用历史悠久。研究表明穿骨七中化学成分主要有苯丙素类,脂肪酸及其酯类,生物碱类等。药理学研究发现,穿骨七具有抑制胃肠运动,抗氧化,抗菌,抗肿瘤等作用。文章通过对穿骨七的化学成分及药理作用进行综述,为其后续开发利用提供理论依据。
关键词: 穿骨七 ；化学成分 ；药理作用 ；抑制胃肠运动 ；抗肿瘤
摘要： 苯丙素类成分是自然界中一类非常重要的天然有机化合物。五加科五加属植物中富含大量的苯丙素类成分,本文对五加属植物1990年至今的相关研究进行调研,共报道了104个苯丙素类化合物,是五加属植物主要活性成分之一,主要包括简单苯丙素、香豆素和木脂素,它们具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、改善心脑血管系统等药理作用。但临床研究较少且研究不全面,导致其开发利用具有一定局限性。为了进一步明确五加属植物中苯丙素类化合物及其药理学活性,本文系统性地归纳了五加属植物苯丙素类化学成分及药理活性,以期为五加属植物的进一步研究提供依据。
关键词: 五加属 ；苯丙素 ；香豆素 ；木脂素 ；抗炎 ；抗肿瘤
被引量
10
摘要： 黄连是中国传统中药材。近些年研究发现,黄连花薹与黄连根有相似的化学活性物质,均含有小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱等多种生物碱类、黄酮类、苯丙素类以及有机酸类成分,具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗菌等功效作用,且黄连花薹在国内部分地区有食用历史,作为黄连的副产物,主要应用于黄连花薹茶饮。目前黄连花薹的急性毒性、亚慢毒性、遗传毒性等方面的毒理学研究未发现其毒性作用,有较好的安全性。对近些年黄连花薹的化学成分、药理作用、毒理学研究以及应用情况进行简单的综述,为进一步综合开发和应用黄连花薹作为保健食品或食品提供思路。
关键词: 黄连花薹 ；化学成分 ；药理作用 ；毒理
摘要： 在研究山银花活性物质基础的过程中,通过正相硅胶柱色谱法,ODS-C18反相柱色谱法及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱法及制备液相色谱等多种色谱方法,从红腺忍冬基源山银花的乙酸乙酯萃取部位分离得到6个化合物。分离得到的化合物通过理化方法及质谱、核磁共振等现代波谱技术分别鉴定为:豆甾醇(1),反式阿魏酸(2),3,3'-二甲氧基鞣花酸(3),灰毡毛忍冬皂苷乙(4),马钱子苷(5),山柰酚(6)。其中化合物1-3为首次在该属植物中发现。化合物1为植物甾醇,化合物2为苯丙素类,化合物3为简单鞣质类成分;化合物4为三萜皂苷类,化合物5为环烯醚萜苷类化合物,化合物6为黄酮类成分。化合物中的4、5、6为该属植物的特征成分。这些化学成分基本反映了该植物的活性物质基础。
关键词: 山银花 ；忍冬属 ；化学成分 ；红腺忍冬
被引量
10
摘要： 综述了锦葵科植物的简单苯丙素、木脂素、香豆素,木脂素并香豆素等苯丙素类化学成分、药理作用等方面的研究进展。
关键词: 锦葵科 ；苯丙素类化学成分 ；药理作用 ；综述
被引量
10
【专利/发明】 • CN202310326123.3 • •
申请日：2023-03-30,
公开日：2024-10-01
申请人： 鲁南厚普制药有限公司
公开（公告）号： CN118731197A
摘要： 本发明属于中药制剂分析领域，具体公开了一种采用超高效液相色谱‑四极杆‑静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC‑Q‑ExactiveMS)技术快速识别归脾合剂中主要化学成分的方法，实现对归脾合剂中的苯丙素类、苯酞类、黄酮类、酮类、萜类等共115种成分进行快速定性鉴别的目的。本方法用于归脾合剂的制剂分析具有简单快速、高效、灵敏等优点，可为建立归脾合剂成分与疗效之间的交互关系提供证据，为临床用药的安全性和有效性的研究提供依据。
摘要： 中药质量标志物（Quality Marker,Q-Marker）是关于中药质量控制的新概念,Q-Marker拟解决在中药材质量控制中质量评价指标与中药有效性关联性不强、专属性差等问题[1]。
玄参（Scrophulariae Radix）为玄参科植物玄参（Scrophularia ningpoensis Hemsl.）的干燥根,具有清热凉血、滋阴降火、解毒散结的功效[2]。由于栽培种植产区生态环境差异性大,导致玄参质量参差不齐。因此,关键质控技术对各产区药材质量的评价具有重要意义。
目的:基于Q-Marker“有效性”、“特有性”、“传递与溯源”、“可测性”四条关键原则研究玄参药材Q-Marker,为玄参质量控制提供依据,确保玄参临床用药的有效性。
方法:（1）采用UPLC-PDA-Q-TOF/MS技术定性分析玄参水煎液中化学成分,并对比玄参发汗前后成分差异,依据玄参水煎液中主要组成成分和发汗前后物质传递规律,明确玄参水煎液中特有性成分以及可传递性成分。
（2）采用UPLC-Q-TOF/MS技术鉴定大鼠灌胃给药后吸收入血的原型成分,基于入血成分生源途径关系分析其特异性;此外,经网络药理学预测原型成分主要作用靶点和通路,依据靶点、通路与玄参传统功效关联性,筛选出功效关联性成分,此外,基于分子对接技术虚拟筛选玄参甘、苦性味物质,综合以上研究结果筛选玄参潜在Q-Marker。
（3）以潜在Q-Marker安格洛苷C对甲亢小鼠模型的药效学实验来验证安格洛苷C作为玄参Q-Marker的合理性。
（4）采用UPLC法同时测定不同产地玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C三种成分含量,初步拟定安格洛苷C的含量限定;比对不同产地玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C的含量差异,对上述三种成分进行相关性分析。
结果:（1）从发汗玄参和鲜玄参水煎液中鉴定出50个共有化合物,其中包括22个环烯醚萜类化合物、25个苯丙素类化合物和3个其他类型化合物,环烯醚萜类和苯丙素类化合物是玄参水煎液的主要组成成分,也是玄参水煎中特有性成分;对比发汗前后玄参水煎液成分差异,发现鲜玄参水煎液中含有3个非共有化合物,共筛选出11个易于辨识的差异性成分,同时,50个共有化合物在发汗前后是可传递的。
（2）给药大鼠血清中鉴定出哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、去阿魏酰安格洛苷C和肉桂酸等5个原型成分,其中哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、去阿魏酰安格洛苷C处于生源途径下游,特异性强;在5个原型成分所作用的通路中,预测MAPK/PI3K/ATK、Rap1/PI3K/AKT等关键通路与清热凉血、滋阴降火功效存在关联,其中哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C可作用于以上关键通路,表明哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C与传统功效联系紧密。同时,分子对接技术表明安格洛苷C为玄参甘、苦性味物质基础。综合以上研究结果,初步认为安格洛苷C为玄参的Q-Marker。
（3）安格洛苷C单独或者与阳性药联合使用时可显著降低甲亢小鼠血清中甲状腺激素的水平（P<0.05）。
（4）建立UPLC法同时测定玄参中哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C三种成分含量,此方法操作简单、高效;初步认为安格洛苷C含量不少于0.2%;河南、湖南玄参中三个Q-Marker含量较高;哈巴苷、哈巴俄苷和安格洛苷C含量无相关性、相互独立,均可作为玄参Q-Marker。
结论:研究发现安格洛苷C特异性强、含量高,易于检测,与玄参传统功效密切相关,在发汗过程中属于可传递性成分,因此,安格洛苷C可与哈巴苷、哈巴俄苷同时作为玄参Q-Marker。
关键词: 玄参 ；中药质量标志物 ；中药血清化学 ；网络药理学 ；分子对接技术 ；甲亢 ；安格洛苷C
被引量
2
摘要： 目的:对解毒壮药草龙(Ludwigia hyssopifolia(G.Don)Exell)和匙羹藤(Gymnema sylvestre(Retz.)Schult.)化学成分进行研究,分离鉴定一系列化合物,并对其中部分化合物进行初步的抗肿瘤、抗糖尿病活性筛选,为草龙和匙羹藤的进一步开发利用提供科学依据。方法:1、草龙和匙羹藤药材粗粉分别用乙醇冷浸提取3次,回收溶剂,得到总提取物。用系统溶剂萃取法分离得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。采用大孔吸附树脂、硅胶、MCI GEL CHP20P、聚酰胺、Sephadex LH-20柱色谱以及半制备高效液相色谱等方法对其化学成分进行分离纯化,对单体化合物采用理化检识、MS、1H-NMR、13C-NMR、UV、IR和CD等多种方法进行结构鉴定。2、运用MTT法对部分单体化合物进行体外细胞毒性实验;通过流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测细胞内相关凋亡蛋白的表达。采用基于L6细胞的葡萄糖摄取测试实验的方法,对部分化合物进行抗糖尿病活性筛选。结果:1、化学成分研究结果:从草龙中分离鉴定43个化合物,分别为β-谷甾醇(1),豆甾醇(2),没食子酸乙酯(3),香草酸(4),对羟基苯甲酸(5),反式对羟基肉桂酸(6),羽扇豆醇(7),2α,3β,23-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(8),actinidic acid(9),齐墩果酸(10),熊果酸(11)、2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸(12),ozoroalide(13),2α,3β,6β,19α,23-五羟基-12-烯-28-乌苏酸(14),反式对羟基肉桂酸乙酯(15),白桦脂酸(16),glycerol monolinoleate(17),3,3′-dimethoxy-4,4′-dihydroxy-stilbene(18),3,5-dihydroxy-7,4′-dimethoxy flavone(19),丁香醛(20),香草醛(21),莨菪亭(22),de-O-methyllasiodiplodin(23),亚麻酸(24),亚油酸(25),salicifoliol(26),芥子醛(27),异香草酸(28),3,3'-bis(3,4-dihydro-4-hydroxy-6-methoxy-2H-1-benzopyran)(29),肉桂醛(30),β-香树脂醇(31),新绿原酸(32),(S)-(-)-3-(3,3-dichloro-2-hydroxy-propyl)-4-chlorine-6,8-dihydroxy-isochromen-1-one(33),(R)-(+)-3-(3,3-dichloro-2-hydroxyl-propyl)-4-chlorine-6,8-dihydroxy-isochromen-1-one(34),没食子酸(35),镰刀菌酸(36),decarboxyellagic acid(37),异荭草素(38),荭草素(39),1H-imidazole-2-carboxylic acid,butyl ester(40),aurantiamide acetate(41),异牡荆素(42),鞣花酸(43)。主要包括12个酚类,9个三萜类,5个简单苯丙素类,4个黄酮类,2个大环内酯类和2个异香豆素类等化合物。化合物33和34通过手性HPLC成功拆分得到,并通过ECD计算确定了立体构型。从匙羹藤中共分离鉴定19个化合物,分别为:β-谷甾醇(44),桂皮酸(45),4-羟基-2-壬烯酸(46),反式对羟基肉桂酸乙酯(47),对羟基苯甲酸(48),3,4-二甲氧基肉桂酸(49),松脂醇(50),亚麻酸(51),亚油酸(52),咖啡酸(53),咖啡酸乙酯(54),阿魏酸(55),木犀草素(56),山柰酚(57),芹菜素(58),4-O-β-D-吡喃葡萄糖基香草酸(59),对羟基苯甲醛(60),棕榈酸(61),邻苯二甲酸二丁酯(62)。主要包括6个简单苯丙素类,3个黄酮类,1个木脂素类等化合物。2、活性筛选结果:体外抗肿瘤活性筛选结果显示化合物8、13-15、17、22-24、40对人喉癌Hep-2细胞株具有抑制作用,化合物13和23对人喉癌Hep-2和TU212均表现出了较强的抑制作用,且对正常肾细胞HEK293影响较小。观察活性最好的化合物23对肿瘤细胞形态学和凋亡的影响以及对Hep-2细胞内凋亡蛋白表达的影响,结果表明23通过上调cleaved Ca spase-3的水平,从而有效诱导细胞凋亡。基于L6细胞的葡萄糖摄取活性筛选结果表明化合物3、8、12、14、27、37、43、50能明显地促进L6细胞的葡萄糖摄取。结论:化合物33和34为从草龙中分离得到的含氯异香豆素类成分,为新化合物,分别命名为(S)-(-)-草龙氯内酯和(R)-(+)-草龙氯内酯;化合物4-9,12-34,36-43为首次从草龙中分离得到。化合物45-62为首次从匙羹藤中分离得到。草龙药材中的大环内酯类化合物ozoroalide(13)和de-O-methyllasiodiplodin(23)对Hep-2肿瘤细胞较好的抑制作用,其抗肿瘤作用和机制值得深入探讨。
关键词: 草龙 ；匙羹藤 ；大环内酯类 ；抗肿瘤 ；抗糖尿病
被引量
3
摘要： 洋葱(Allium cepa L.)系百合科(Liliaceae)葱属(Allium)植物,是世界上广泛种植的蔬菜,也是重要的药食同源植物。洋葱常以鳞茎入药,具有健胃消食、清热利尿、降血糖、消炎抑菌等功效,可用于治疗高血压、高血脂、冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、骨质疏松及食道癌等,同时还可以调节人体的生理平衡和新陈代谢。现代研究表明,洋葱中化学成分有黄酮类、含硫类、含氮类、甾醇类以及简单的酚酸类化合物。同时,洋葱具有多种生物活性,如抗氧化、抗肿瘤、降血糖血脂、解痉平喘等。本论文首先对洋葱皮70%乙醇提取物依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取,然后对萃取层进行抗氧化活性筛选,结果显示乙酸乙酯层抗氧化活性较强,因此选择乙酸乙酯层进行进行化学成分的研究。综合运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱以及制备型Rp-HPLC等多种色谱学方法对乙酸乙酯层进行分离纯化,共分离得到52个化合物。通过核磁共振、红外、紫外、CD等波谱学方法,结合化合物的理化性质鉴定了各化合物的结构。分离得到的化合物鉴定为:quercetin(1),isorhamnetin(2),quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside(3),quercetin 7-O-β-D-glucopyranoside(4),quercetin4′-O-β-D-glucopyranoside(5),4′-methoxyl-quercetin-3′-glucopyranoside(6),quercetin 3,4′-O-β-D-diglucopyranoside(7),(2R,3S)-3,5,7,3’,5'-pentahydroxydihydroflavonol(8),(2S,3S)-taxifolin(9),(2S,3S)-3′-O-methyltaxifolin(10),(2S,3R)-taxilfolin4′-O-β-D-glucopyranoside(11),(2S,3S)-taxilfolin4′-O-β-D-glucopyranoside(12),(2R)-naringenin(13),1,3,6,8-tetrahydroxyxanthone(14),3-[3-(1-ethyl ester-2,4,6-trihydroxyphenyl)]-2,3-epoxyflavanone(15*),3-[4-(1,3,6,8-tetrahydroxyxanthone)]-2,3-epoxyflavanone(16*),2-O-β-D-glucopyranosyl-6-hydroxy-benzoic 4-hydroxyphenethyl ester(17*),phloroglucinoyl-3,4-dihydroxybenzoate(18),methyl2-{[(3,4-dihy-droxyphenyl)carbonyl]oxy}-4,6-dihydroxybenzoate(19),jaboticabin(20),lunularic acid(21),3,4'-dihydroxy-3'-methoxybibenzyl-2-carboxylic acid(22),lunularic acid 4'-O-β-D-glucopyranoside(23),3-hydroxy-4-O-β-D-glucopyranoside methyl benzoate(24),3-hydroxy-4-O-β-D-glucopyranoside ethyl benzoate(25),methyl2,4,6-trihydroxybenzoate(26),ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate(27),1,3,8,9-tetrahydroxydibenzo[b,d]pyran-6-one(28),3,4-dihydroxybenzoic acid(29),methyl 3,4-dihydroxybenzoate(30),ethyl3,4-dihydroxybenzoate(31),(2E)-3-phenyl-2-propenoic acid(32),(E)-ethyl-3-(4-methoxyphenyl)-2-propenoate(33),diisobutyl phthalate(34),dibutyl phthalate(35),4-hydroxyphthalide(36),(-)-epiloliolide(37),(2α,3β,4α)-2,3,23-trihydroxyursa-12,20(30)-dien-28-oic acid(38),7,11,15-Trimethyl-3-methylene-1,2-hexadecanediol(39),methyl hexadecanoate(40),ethyl hexadecanoate(41),methyl(Z)-11-octadecenoate(42),ethyl(Z)-11-octadecenoate(43),methyl linoleate(44),ethyl linoleate(45),hexahydrofarnesyl acetone(46),tetradecanoic acid(47),palmitic acid(48),cetostearic acid(49),ergosterol peroxide(50),β-sitosterol(51),β-daucosterol(52)。在分离得到的52个单体化合物中,黄酮类有16个(1-16),三萜类1个(38),甾醇类3个(50-52),苯丙素类2个(32-33),脂肪族11个(39-49),其他类化合物有19个(17-31、34-37),其中化合物15、16、17为新化合物。为提高洋葱总黄酮部位中黄酮类化合物的含量,采用聚酰胺树脂对乙酸乙酯层中的总黄酮进行富集。通过UPLC分析,洋葱70%乙醇提取物及乙酸乙酯层中含量最大的是化合物1(quercetin),含量分别为131.9±19.5 mg/g及286.7±19.0 mg/g。另外,洋葱70%乙醇提取物中总黄酮的含量为211.9 mg/g,乙酸乙酯层中的总黄酮含量为504.1mg/g。乙酸乙酯层经聚酰胺柱富集后,60%甲醇洗脱部分总黄酮含量达到902.5 mg/g。结果表明,洋葱70%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取后,通过聚酰胺柱可以有效地富集洋葱中的总黄酮。对洋葱皮的总提取物、各萃取层、单体化合物以及聚酰胺柱富集得到的馏分分别进行了清除DPPH自由基、清除超氧自由基、吸收氧自由基和铁还原能力等四种体外抗氧化活性测试。在清除DPPH自由基能力测试中,与阳性对照维生素C(24.60±1.47μmol/L)和没食子酸(13.38±0.61μmol/L)对比,化合物1(14.34±0.08μM)、3(21.52±0.84μM)、4(23.14±0.61μM)、9(21.91±2.15μM)、16(26.31±0.62μM)、28(10.37±1.53μM)和31(1.98±0.16μM)显示较强的清除DPPH自由基活性。另外,70%乙醇提取物、乙酸乙酯层以及聚酰胺柱80%洗脱馏分和纯甲醇洗脱馏分也显示出较强的清除DPPH自由基活性。在清除超氧自由基活性测试中,聚酰胺柱20%洗脱馏分(61.57±1.52μg/m L)和80%洗脱馏分(65.04±5.79μg/m L)显示出较强的活性。在吸收氧自由基活性测试中,化合物1、5、7、9和14,乙酸乙酯层和聚酰胺柱80%洗脱馏分,均显示出较强的活性,其中化合物1(25.90±8.09μmol TE/g)活性最强。在铁还原能力测试中,化合物1、2和3,以及乙酸乙酯层、聚酰胺柱各洗脱馏分等,显示出较强的活性。综合以上四个抗氧化活性测试,表明黄酮类化合物以及各黄酮富集馏分显示出较强的抗氧化活性,其他简单酚类化合物抗氧化活性较弱。
关键词: 洋葱 ；化学成分 ；黄酮类 ；定量 ；富集 ；抗氧化活性
被引量
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摘要： 目的:筛选具有防晒潜力的中药材,活性成分负载于脂质体结构中并分散于空白乳剂基质中制备成含天然防晒成分的中药脂质体防晒乳,提高中药防晒成分的稳定性,增强其抗紫外线效果。方法:采用UV技术对100种常用中药材醇提液的紫外吸光度进行初步测定,筛选出紫外防护能力较强的药材。建立降香、密蒙花混合物中甘草素、柚皮素、蒙花苷、毛蕊花糖苷的HPLC含量测定方法,并进行方法学考察。以降香、密蒙花中的黄酮类及苯乙醇苷类作为防晒的活性成分,AB-8大孔吸附树脂进行纯化工艺研究,梯度洗脱获得有效部位。从薄膜分散法、乙醇注入法和熔融法中筛选中药防晒脂质体的最佳制备工艺,采用单因素考察和正交试验优化中药防晒脂质体处方工艺;以脂质体的包封率为评价指标进行最佳工艺的质量评价,测定脂质体的抗氧化能力、总氧化还原能力,对中药防晒脂质体进行功效性评价。选择O/W型乳剂配方制备中药防晒乳,采用单因素实验对防晒乳配方进行初步考察,并通过响应面法优选最佳处方工艺;采用UV法比较中药防晒乳与市售防晒乳UVB区的紫外防护效果,以紫外灯模拟日光中紫外线照射,测定中药防晒乳的防晒指数;采用UPLC-Q-TOF/MS技术分析中药防晒乳的化学成分,通过精确质量数和同位素峰度比确定分子式,对所添加的中药标志性成分开展检测,为防晒乳中功效性成分研究提供参考和技术支持。结果:实验结果显示在100中常用中药材中降香、密蒙花的醇提液紫外吸收效果表现良好,密蒙花醇提液在在UVB和UVA区紫外吸光度分别为108.81、79.82,降香醇提液在在UVB和UVA区紫外吸光度分别为153.34、62.11。建立的密蒙花、降香HPLC多指标性成分含量测定方法符合分析要求,确定采用95%乙醇回流提取1h为最佳提取方法。确定密蒙花中蒙花苷、毛蕊花糖苷的AB-8大孔吸附树脂最佳洗脱工艺以大孔树脂床体积的1/6倍作为最大上样量,以5倍量树脂柱体积的70%乙醇为洗脱剂。降香中甘草素、柚皮素的AB-8大孔吸附树脂最佳洗脱工艺以大孔树脂床体积的1/7倍为最大上样量,先用30%乙醇除杂,再以60%乙醇为洗脱剂,用量为6倍量树脂柱体积。洗脱后甘草素的纯度提高了2.35倍,柚皮素的纯度提高了1.59倍;毛蕊花糖苷的纯度提高了2倍,蒙花苷的纯度提高了1.58倍。筛选薄膜分散法为脂质体的最佳制备工艺,确定大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为5:1、大豆卵磷脂与胆固醇的总量为120mg、旋蒸温度40℃、中药提取物冻干粉的用量10mg为最佳制备工艺;所得脂质体呈现椭圆形,平均粒径为407.5nm,Zeta电位为-30.3m V,脂质体的包封率约为87.5%,脂质体的DPPH自由基清除能力高于维生素C,并且在4℃较为稳定。总抗氧化能力实验中药醇提物溶液在质量浓度为0.3mg/m L时达到最大值,中药防晒脂质体则在质量浓度为0.4mg/m L时达到最大值,此时两者相差2.7个FRAP值。响应面优化法确定中药防晒乳的最佳制备工艺为油相添加量为18%、乳化剂添加量为2%、乳化温度为80℃为中药防晒乳的最佳工艺条件,最佳工艺验证试验确定中药防晒乳离心乳层保留率的实际实验值为94.81%;所中药防晒乳乳液细腻,均匀一致,颜色为淡黄色,p H值平均值为5.43±0.2。通过耐热耐寒离心考验,保湿性能良好,无皮肤刺激性。胶布法测得中药防晒乳的紫外吸光值为UVB=0.98、UVA=0.75,具备最小紫外线防护效果,动物实验测定中药防晒乳的SPF值和MPPD值分别为13.9和PA+。实验建立了中药防晒乳的UPLC-QTOF-MS/MS高效快速分析的方法,从中药防晒乳中初步鉴定出48个化学成分,包括31个黄酮类成分、4个苯乙醇苷类成分、2个木脂素类成分、2个萜类成分、2个醌类成分、2个苯丙素类成分和2个其他成分。结论:密蒙花和降香药材在不同波段有着不同的紫外吸收能力,因此实验将密蒙花、降香药材进行复配,达到了较好的广谱紫外线吸收效果;所建立的密蒙花、降香混合物多指标成分的含量测定方法对密蒙花、降香混合物中多指标性成分同时进行检测,方便快捷;AB-8大孔吸附树脂树脂对黄酮类和苯乙醇苷类成分有着良好的分离纯化效果,在去除水溶性杂质的同时对大部分脂溶性杂质也有去除能力,方法简便且可重复利用,可明显提高产品的纯度。经过制备工艺优化后所制得的脂质体能够有效提高包封药物的溶解度,同时提高活性成分的稳定性。响应面分析法确定最佳制备工艺所制备的中药防晒乳稳定性良好,设计合理、制备工艺简单、质量可控制。能够保护皮肤免受紫外线照射的损伤。UPLC-Q-TOF-MS/MS技术方法快捷、准确,能够用于对中药防晒乳提取物中的化学成分的全面鉴定。
关键词: 降香 ；密蒙花 ；脂质体 ；防晒 ；抗氧化 ；UPLC-Q-TOF-MS
摘要： 高脂血症（HLP）是一种与脂代谢紊乱相关的疾病,若该症状持续高发,将会引发其它心脑血管疾病。临床上,常采用他汀类、胆汁酸螯合剂等西药进行治疗,但因其在治疗过程中会有治疗抵抗、不耐受等表现;研究者们将中药作为治疗高脂血症的新方向,菟丝草为旋花科植物菟丝草Cuscuta chinesis Lam.（CCL）的干燥地上部分。在《神农本草经》中首次记载,并将其列为上品。菟丝草具有保护眼睛、延缓衰老、提高生育能力等功效,主治黑胆质性或异常黏液质性疾病,如寒性抑郁症、失眠等症状。课题组前期研究表明菟丝草具有降血脂活性,国内外研究多将其作为降血脂复方中的组方药材。但有关菟丝草全草的物质基础、降血脂作用机制方面不够深入。为此,本文以菟丝草为研究对象,对其进行化学成分分析,制备其活性部位并进行质量标准研究,初步推测并验证其降血脂作用机制,其主要内容包括:第一部分介绍了高脂血症的病因以及其西药、中药治疗等;简单描述了菟丝草植物化学成分及药理作用;从指纹图谱、含量测定等方面列举了液质联用技术在中药质量控制中的相关应用。第二部分建立了不同寄主菟丝草指纹图谱。通过HPLC-Q-TOF-MS技术对菟丝草进行化学成分分析,共鉴定出67种化学成分,包括肉桂酸类衍生物3个;生物碱类4个;酚酸及其衍生物8个;苯丙素类14个;黄酮类29个以及其他类化合物7个,进一步丰富了菟丝草的物质基础。第三部分是以金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷及槲皮素等为指标成分,结合单因素、正交试验,将菟丝草活性部位最佳提取工艺确定为:料液比为1:18,乙醇浓度为70%,提取时间为1 h,提取次数为3次;在此基础上,借助大孔吸附树脂试验,对上样浓度、洗脱乙醇浓度等工艺参数的考察,确定其最佳纯化工艺:上样浓度为0.4 g·mL-1溶液,以3 BV·h-1吸附,上样量和除杂用水量均为4 BV,最后用5 BV的70%乙醇洗脱,收集该洗脱液。经处理,即得菟丝草活性部位。第四部分通过鉴别、检查以及含量测定等研究,对菟丝草活性部位进行质量评价。第五部分借助中药系统药理学、蛋白分析等数据库预测菟丝草抗HLP作用机制,通过CytoNCA插件对菟丝草治疗高脂血症的共有靶点连接菟丝草化学成分将初始网络标准化,利用细胞实验验证。结果表明,从菟丝草中筛选出抗HLP的槲皮素、芹菜素等6个核心靶点,并表示菟丝草可能通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路作用于HLP;细胞实验表明,与空白对照组相比,模型组PI3K和GSK3β的mRNA水平显著升高（P<0.01）,AKT1的mRNA水平显著降低（P<0.01）;加入菟丝草后,中、高剂量组PI3K和GSK3β的基因（蛋白）的表达水平随给药剂量的增加而下降,具有统计学差异（P<0.01）,AKT1的基因（蛋白）表达量随菟丝草给药剂量的增加而增加,且中、高剂量组的变化具有统计学差异（P<0.01）。
关键词: 菟丝草 ；制备工艺 ；质量标准 ；高脂血症 ；网络药理学
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