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【期刊论文】 • 曲鹏刘培培付鹏王乂 +1位作者 • 《微生物学报》 • 2012年第9期 1103 - 1112，共10页

摘要：【目的】从黄河三角洲耐盐微生物的代谢产物中寻找具有抗菌和抗肿瘤活性的化合物。【方法】应用化学与生物活性相集成的筛选方法,从耐盐微生物中筛选获得代谢产物丰富并具有生物活性的目标菌株;通过高盐胁迫目标菌株,利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等方法对发酵产物进行分离、纯化,运用波谱解析、钼靶X-射线单晶衍射分析、圆二色散谱(CD)和密度泛函数(DFT)-ECD的计算鉴定化合物的结构。【结果】从采自黄河三角洲的泥土样品中得到一株耐盐真菌HK14-01,鉴定为产黄青霉Penicilliumchrysogenum;从其发酵产物中分离鉴定了8个化合物:(2S,3R)-oxaline(1,主产物)、(3R,4R)-3,4,8-trihydroxy-3,4-dihydronaphthalen-1(2H)-one(2)、(Z)-N-(4-hydroxystyryl)formamide(3)、(E)-N-(4-hydroxystyryl)formamide(4)、emodin(5)、4-(2-hydroxyethyl)benzene-1,2-diol(6)、methyl 2-(4-hydroxyphenyl)acetate(7)和2-(4-hydroxy phenyl)acetonitrile(8);化合物1、3和4对大肠杆菌以及化合物1和5对金黄色葡萄球菌表现出抑菌活性,化合物5对P388细胞表现出微弱的细胞增殖抑制活性。【结论】首次确定了化合物2的绝对构型、首次报道了化合物1和2的CD数据;从黄河三角洲的耐盐微生物的次生代谢产物中可以得到活性化合物,这一区域的耐盐微生物资源值得深入研究。

摘要译文

关键词: 黄河三角洲 ；耐盐真菌 ；产黄青霉；次生代谢 ；抗菌活性

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被引量 45

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【学位/硕士】 • 曲鹏 • 中国海洋大学 • 导师：朱伟明 • 2012年

摘要：海洋耐盐真菌是产生结构新颖的活性化合物的重要来源。黄河三角洲独特的地理位置和生态环境孕育了丰富而独特的微生物资源，这些微生物资源有可能是结构新颖的活性化合物的重要来源，但是关于开发这一区域微生物次生代谢产物的研究却相对较少。而南中国海近年来一直是国际天然产物研究开发的热点地区，同时海绵作为海洋天然产物的重要来源也一直吸引着广泛的关注。为了从上述来源寻找新的活性先导化合物，本论文采用了化学与生物活性相结合的集成筛选方法，开展了耐盐微生物的研究工作。内容包括：微生物的分离；发酵目的菌株的筛选及发酵条件的优化；菌株次生代谢产物的分离纯化；单体化合物的结构解析；化合物活性的初步评价。从采自青岛地铁勘探井的3个深层土壤样品和南海西沙群岛的3个海绵样品中分离得到了67株微生物。采用对小鼠白血病P388肿瘤细胞抑制活性及抑菌活性的活性筛选筛选，并结合HPLC指纹图谱及薄层色谱进行化学筛选，得到2株发酵菌株HK14-01和1051，分别鉴定为产黄青霉Penicillium chrysogenum和白曲霉Aspergillus candidus。在通过变换培养方式、培养基、盐度等条件后，选定了最佳发酵条件，对目标菌株进行了发酵。对发酵产物运用萃取，薄层色谱，正相、反相硅胶柱色谱、LH-20凝胶柱色谱、反相高压液相等化学的分离纯化手段，一共从两株真菌的发酵产物中分离得到了23个单体化合物（1-23）。继而利用理化性质和波谱学方法（IR，UV，MS，NMR，X-ray，CD）阐述了这23个化合物的化学结构（化合物结构及名称参见Table1），其中新化合物1个，为对联三苯类化合物；同时分到的还有9个类似的对联三苯类化合物。得到了一个结构独特又具有良好活性的化合物oxaline，采用铜靶单晶衍射的方法首次阐明了其绝对构型。我们也首次通过CD计算的方法确定了化合物2的绝对构型。采用滤纸片法对部分单体化合物的抗菌活性进行了初步评价，采用MTT法、SRB法对部分单体化合物的抗肿瘤活性进行了初步评价。对对联三苯类化合物进行了抗炎活性测试。综上，本文采用集成筛选的方法获得耐盐天才菌株，并阐明了两株耐盐真菌产生的23个次生代谢产物的化学结构，获得新化合物1个，并对这些化合物的生物活性进行了初步评价。这些实验结果证明：耐盐微生物仍然具有很大的开发研究价值，继续对海洋来源耐盐真菌的次生代谢产物进行研究是寻找结构新颖的药物先导化合物的有效手段。

摘要译文

关键词: 耐盐真菌 ；次生代谢产物 ；黄河三角洲 ；海绵；生物活性

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【学位/硕士】 • 廖庆云 • 中国海洋大学 • 导师：朱伟明 • 2014年

摘要：耐盐微生物生活和培养的环境比较特殊，而普通微生物很难生存，在这种环境中可能具有特殊的生物代谢途径，从而可以产生独特的代谢产物。山东东营黄河三角洲自然保护土壤严重盐渍化，许多地方土壤含高盐度，同时受到海陆的共同作用，形成了比较独特的生态环境。这一区域存在着能产生结构新颖活性化合物的耐盐微生物，值得深入研究。为了研究黄河三角洲来源耐盐菌株次生代谢产物，我们结合化学和活性集成筛选模式，对黄河三角洲盐碱地土壤中微生物进行了研究。主要内容为：耐盐微生物的分离纯化；耐盐真菌的筛选和和发酵条件优化；耐盐真菌次生代谢产物的分离纯化；单体化合物结构鉴定和活性初步评价。从黄河三角洲泥土样品、西沙群岛海域海绵和珊瑚样品以及南海深海海水和海泥样品中分离纯化排重后得到耐盐菌株192株，包括121株真菌，56株放线菌和15株细菌。并通过化学和活性相结合的筛选方法，筛选到两株耐盐真菌OUCMDZ-2713和OUCMDZ-2702，菌株鉴定分别为支孢样支孢霉菌(Cladosporium cladosporioides)和支顶孢属(Acremonium sp.)真菌，并对其次生代谢产物进行进一步探索研究。通过考察不同培养方式、培养基、酸碱度和盐度四个方面对这两株耐盐真菌次生代谢产物的影响，确定大发酵条件。对其次生代谢产物采用减压和加压硅胶柱色谱、薄层色谱、凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱等多种色谱分离技术进行分离纯化，从两株真菌的发酵产物中共分离到22个单体化合物，结合质谱和核磁共振波谱等波谱学手段鉴定化合物结构，最终鉴定17个化合物结构(1-17)（结构见图1）。结构类型分别为2个内酰胺类（1、2），7个二酮哌嗪类（3-9），3个脂肪酸酯类（13-15），2个核苷类（10、11），1个邻二醇类（12），1个吡咯甲酰胺（16）以及一个甾醇化合物（17），其中内酰胺类化合物1、2以及脂肪酸酯类化合物13为新化合物。采用纸片法对部分化合物进行了抑菌活性初步评价，基本无抑菌作用。采用MTT法和CCK-8法对部分化合物的MCF-7、A549和K562细胞毒活性进行初步评价，均没有抑制作用。推测其活性部分化合物还未获得。综上，本文结合化学与活性集成筛选模式得到两株耐盐真菌，并对这两株耐盐真菌次生代谢产物进行了深入研究，共分离鉴定了17个单体化合物，获得3个新化合物，并对这些化合物的抑菌和细胞毒活性进行了初步评价。这些结果表明耐盐真菌有很大到研究潜力，值得深入系统的进一步探索。

摘要译文

关键词: 耐盐微生物；耐盐真菌 ；黄河三角洲 ；次生代谢产物 ；活性

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【学位/硕士】 • 陈正乾 • 中国海洋大学 • 导师：朱伟明 • 2012年

摘要：海洋资源物种丰富，其生物物种占地球生物物种80%以上，高盐、高压、低温、寡营养等条件造就了这种特殊的海洋生态环境，从而使得海洋生物次生代谢产物具有高度的生物多样性，因此海洋资源开发研究日益成为人们关注的热点。据统计，全球范围内已从海洋生物资源中分离获得总数达20000多种新化合物，其中50%以上都具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎等生物活性。红树林是位于热带与亚热带海岸潮间带的木本植物群落，黄河三角洲是位于湖海交汇的地带，都具有特殊的生态环境，为从中寻找有价值的海洋微生物提供了丰富的物种资源，近年来从中寻找到了具有广泛生物活性的海洋微生物来源的天然产物也日益受到国际上的关注。因此，本文从海南文昌红树林土壤样品、黄河三角洲水生生物样品以及涠洲岛柳珊瑚样品中分离筛选出109株耐盐海洋微生物，包括42株真菌、55株放线菌和12株细菌。并采用化学和生物学的集成筛选方法，从中选择一株耐盐真菌OUCMDZ-1925进行系统研究。目标菌株OUCMDZ-1925经18sRNA和ITS序列鉴定为土曲霉Aspergillusterreus。并对其发酵获得的次生代谢产物多次运用TLC薄层色谱，正相硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱，HL-20凝胶柱层析色谱，反相高效液相色谱等现代色谱技术进行分离纯化，从目中分离得到12个单体化合物，结合现代核磁波谱技术对其进行鉴定，最终鉴定出9个化合物的结构，结构类型分别为7个3-苯基-4-苄基-γ-丁内酯类化合物以及一个麦角甾醇和1个六取代苯类化合物。其中化合物1和2为新化合物，互为同分异构体，分别命名为Z-alkelactones A和B；已知化合物分别为右旋丁内酯I (3)、丁内酯II (4)、丁内酯III (5)、丁内酯IV (6)、曲霉内酯A(7)、3,5,6-三甲基-2,4-二羟基苯甲酸甲酯(8)和麦角甾醇（9）。

摘要译文

关键词: 次生代谢产物 ；海洋微生物；耐盐真菌 ；黄河三角洲 ；丁内酯I

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