摘要: 灵芝是一种药食两用真菌,含有多种生物活性成分,具有广泛的药理活性,一直被用来预防和治疗各种人类疾病,已在亚洲应用的数千年。灵芝的产量和质量远不能满足临床医疗和商业市场需求,提高灵芝的产量和质量已成为近年来的研究热点。利用液体菌种来进行人工栽培和液态发酵灵芝材料具有周期短、质量稳定、易定向富集目标产物和可实现工业自动化生产等优势已引起国内外学者的广泛关注。本研究主要探究了液体菌种制备的关键技术及规模化生产对液体菌种的影响。笔者分别从平板培养、摇瓶培养及发酵罐培养对液体菌种的制备进行了探究并对摇瓶和发酵罐规模制备液体菌种的代谢活力进行了评价,旨在丰富液体菌种制备的评判标准,进一步为灵芝工业化生产提供参考和借鉴。研究发现平板装液量对菌丝体生长有显著影响,当平板装液量大于等于15mL时,平板菌丝体生长速度无明显差异。平板不同接种部位对一级摇瓶培养有显著性影响,当接种距离中心点3cm时,菌丝对底物的利用率最高。对摇瓶液态菌种的培养基进行了优化,最佳配方为葡萄糖14.5g/L、酵母浸粉8.5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、七水硫酸镁1.5g/L,液态菌种生物量为9.82g/L,菌丝体对还原糖的得率为0.79g/g,对液体菌种培养基进行优化,提高液体菌种对底物的利用率,可以减少底物利用较少带来的不稳定性。在此基础上,对不同发酵规模制备液体菌种进行了探究并对其代谢活力进行了评价,发现采用摇瓶培养液态菌种,250mL摇瓶培养液体菌种具有较高的代谢活力,最早达到发酵终点;采用发酵罐培养液态菌种,50L发酵罐制备液体菌种具有较好的代谢活力,相对于摇瓶培养液体菌种代谢活力变化具有较好的持久力;表明了采用发酵罐制备液体菌种具有更好的商业化前景。 摘要译文